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關于橡膠樹論文范文資料 與橡膠樹HAD家族蛋白酸性磷酸化酶基因VSP2表達分析有關論文參考文獻

版權:原創標記原創 主題:橡膠樹范文 科目:畢業論文 2019-12-15

《橡膠樹HAD家族蛋白酸性磷酸化酶基因VSP2表達分析》:本文是一篇關于橡膠樹論文范文,可作為相關選題參考,和寫作參考文獻。

摘 要 植物營養儲藏蛋白VSP2是HAD家族蛋白(haloalcanoic acid dehalogenase super family, HAD)的主要成員之一.該蛋白具有酸性磷酸化酶的功能,在橡膠樹氮素儲存和植物凝集素防御脅迫中發揮著重要的作用.在前期研究中,利用cDNA-AFLP获得了1條和橡膠樹棒孢霉落葉病抗病性相關的差異表達片段EST-IAN-24,通過Blast比對分析,發現該基因片段和其他物種的VSP2基因具有較高同源性.采用PCR和RT-PCR技術,克隆获得了一個橡膠樹VSP2基因的cDNA和基因組序列,并將該基因命名為HbVSP2.基因序列分析顯示,該基因編碼區全長(CDS)975 bp,含有4個內含子和5個外顯子,編碼324個氨基酸,推測該蛋白的分子質量為30.01 ku,等電點為4.80.該基因蛋白是HAD家族蛋白中的酸性磷酸酶,具有DXDXT基序特征.qRT-PCR 定量分析發現,受多主棒孢病菌侵染后,HbVSP2基因在橡膠樹抗、感品種中的表達量存在著明顯的差異,抗病品種(IAN873)的表達量顯著高于感病品種(PR107),且在接種12 h达到了峰值;此外,該基因在水楊酸、茉莉酸甲酯、乙烯的处理下均能誘導其表達,對茉莉酸甲酯的敏感性明顯高于其他2個激素.本研究初步表明,HbVSP2基因可能參和橡膠樹和多主棒孢病菌的互作并且和抗病性相關.

關鍵詞 橡膠樹;HbVSP2基因;克隆;表達分析

中圖分類號 S794.1 文獻標識碼 A

Abstract VSP, Vegetative storage protein, is one of the main members of haloalcanoic acid dehalogenase super family(HAD). It has acid phosphatase activity and plays an important role in nitrogen storage and plant lectin defense in rubber tree. In earlier study, we got a differential expression fragment related to Corynespora cassicola resistance in rubber tree with cDNA-amplified fragment length polymorphism(cDNA-AFLP)technology. Blast results showed that this fragment had high homology with VSP2 in other gene species. Using RT-PCR and PCR technology, cDNA and genomic sequences of a rubber tree VSP2 encoding gene OR VSP2 were cloned, and the gene was named as HbVSP2. Sequence analysis revealed that the CDS length of HbVSP2 was 975 bp, encoding a protein of 324 amino acids with molecular weight of 30.01 kD, and pI value of 4.80. Exon/intron structure analysis revealed 5 exons and 4 introns in HbVSP2 genomic sequence. The gene was an acid phosphatase gene,which had the characteristic of DXDXT domain in HAD family protein. The expression pattern of HbVSP2 in rubber plants was assessed by qRT-PCR. The tissue-specific expression analysis indicated that the HbVSP2 was mainly expressed in the stem. When C. cassiicola infected, the expression level of HbVSP2 was significantly higher in the resistant rubber germplasm(IAN873)than in the susceptible rubber germplasm(PR107). The expression of HbVSP2 was up-regulated under ethylene, salicylic acid and methyl lasmonate treatment, especially methyl jasmonate. These results showed that HbVSP2 involved in rubber tree resistance signal pathway.

Key words Hevea brasiliensis; HbVSP2; Cloning; Expression analysis

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2016.06.010

植物營養儲藏蛋白(Vegetative Storage Proteins, VSPs)是植物營養組織中,氮素和氨基酸臨時儲存的主要形式,對減少植物在越冬期間營養物質的損失、生物量的積累以及抵抗不良環境的能力具有重要作用[1].相關研究都充分肯定了植物營養貯藏蛋白質(VSPs)在氮素貯藏,植物凝集素積累,以及具有酸性磷酸化酶活性等方面的重要功能[2-4],而VSP2作为植物防御相關蛋白的研究較少.VSP2是一種植物防御蛋白,能被多種因素如病蟲侵害、創傷、茉莉酸甲酯等誘導表達,在參和植物抗病信號傳導途徑中的茉莉酸信號途徑中發揮著重要的作用[5-6].VSP在分類上屬于HAD家族成員,具有保守的的DXDXT基序[7].Liu等[8]發現VSP2能明顯延遲昆蟲的發育和增加其死亡率,將保守基序DXDXT中親和的Asp119進行點突變成谷氨酸,會導致VSP2酸性磷酸化酶活性完全喪失,同時抗蟲活性也完全喪失.Berger等發現vsp1和vsp2 mRNA及蛋白的表達能被昆蟲的食草作用誘導[5].cev1突變體组成型表達VSP1和VSP2,具有更高的抗病性[6].上述研究揭示了擬南芥中的VSP2可能是一種防御蛋白,其防御功能和酸性磷酸酶的活性有關.

橡膠樹論文參考資料:

結論:橡膠樹HAD家族蛋白酸性磷酸化酶基因VSP2表達分析為大學碩士與本科橡膠樹畢業論文開題報告范文和相關優秀學術職稱論文參考文獻資料下載,關于免費教你怎么寫中國橡膠樹怎么來的方面論文范文。

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